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一抗,二抗,单抗,多抗的来源和区别。


抗体(或免疫球蛋白)是免疫系统对“外来”物质,即微生物上存在的抗原作出反应而产生的糖蛋白。

每一种抗体都是独特的,针对特定类型的抗原——它会与同源抗原结合,中和微生物在感染过程中产生的毒素。

抗体存在于血浆、血清、唾液和眼泪等体液中——事实上,它们约占血浆蛋白质的20%。

抗体的结构

抗体是Y形分子,3个部分大小大致相等。它们由两个相同的轻链和两个相同的重链——二硫键将两个重链连接在一起,每一个重链都连着一个轻链。

这些链的特殊结构和组合使得抗体分子可以同时与多个细胞结合。

抗体分子的不同部分可以与多种抗原结合,也可以与某些效应分子结合。

抗体的可变区域或V区域表示/是指Y结构的两个臂,该区域可以与抗原结合。

相反,Y结构的茎叫做常数或C区域,它只能与有限数量的效应细胞和分子结合。

一抗和二抗

抗体是研究中的常用试剂。根据抗体的结合能力和用途,可以将它们分为一抗和二抗。

一抗

能与特定蛋白质或目的生物分子结合的抗体称为一抗。一抗以单克隆抗体(mAbs)或多克隆抗体(pAbs)的形式生产,以大鼠、小鼠、山羊和兔子等为宿主。

单克隆抗体和多克隆抗体各有优缺点,在选择一抗前需要综合考虑。

单克隆抗体是由动物的单个b细胞克隆产生的,因此只针对抗原的一个表位。

多克隆抗体是由一个动物的多个b细胞克隆产生的,是具有针对一个抗原的多个表位的抗体的混合。

单克隆抗体对于相同的样本和标准化实验,产生最小或没有背景染色的试验,是最理想抗体。使用单克隆抗体可减小与非目的蛋白发生交叉反应的可能性。

由于多克隆抗体可以与单个抗原的多个表位结合,它们能够识别出抗原的微小变化。它们还能产生更强的抗原检测信号。因此,如果实验涉及蛋白质变性它们是最理想的选择。

一抗以不同的来源和纯化形式被研发生产。它们还用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默氏症和帕金森症的生物标记物。

二抗

二抗与直接与目标抗原结合的一抗结合。一抗的V区与抗原结合后,标记的二抗将其V区附着于一抗的茎或C区。

利用这种相互作用,二抗可以间接帮助检测和纯化目标蛋白(抗原)。

二抗在标记和检测方面更加敏感和灵活,因此,它们被用于比色法、化学发光和荧光检测中一抗的标记,也用于流式细胞术、western blotting和细胞成像等一系列试验。

二抗的选择是根据一抗-免疫球蛋白IgG或IgM的种类、试验类型和宿主来进行的。

由于大多数一抗是用少数几种宿主开发的,而且大多数一抗属于IgG类,制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的现成的二抗。

常用的二抗有抗兔IgG、抗小鼠IgG、抗鸡IgY或抗山羊IgG。所选择的二抗要能够识别产生一抗的宿主物种,例如,为了检测从小鼠产生的一抗,需要使用抗小鼠二抗。

针对特定试验的最佳二抗也取决于标记类型。在ELISA和western blotting中,标记通常是化学发光、比色法或荧光法,但在流式细胞术和免疫荧光法中,仅使用荧光标记。


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